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常用的精子洗涤方法有三种:
一、简单的洗涤法就是用培养液稀释精液标本,直接离心,收集沉淀的精子团,该方法可回收最多的精子,但夹杂死精子和其他细胞碎片;
二、直接上游法是根据精子的泳动能力选择精子。将培养液加到液化精液上方,也可以将精液加到培养液的下方,活动的精子会自动游泳到培养液里表面呼吸新鲜空气,将聚集在培养液表层上方的优质精子收集备用;
三、非连续密度梯度离心法将精液放置在不同密度梯度培养液的上方,在离心过程中由于密度不同而分离,常用上层40%和下层80%的密度梯度液,加上活动精子主动游动,穿过梯度液在离心管底形成一个松软的沉淀团,可获得部分活力很好的精子,且不含碎片、白细胞、非精子细胞和退化的生精细胞。一般生殖中心医生会根据患者的具体情况进行选择,总的原则就是制定个体化方案,尽量选择操作简单快速,离心力低,操作轻柔,以减少对镜子的损伤,尽可能除去死精子和其他细胞如白细胞和细菌等。目前各大生殖中心比较常用的是密度梯度离心法。其原理是:活的精子、死的精子、白细胞及细菌等沉降系数不同,在一定的离心力的作用下,会有不同的沉降速度,在不同的梯度液中形成区带。
当然,对于极重度少精子症患者或手术穿刺取精的患者,密度梯度离心法是不适合的。除密度梯度离心法之外,根据取精的形式、精液质量的不同,可能还会使用直接上游法、离心后上游法、直接在高倍视野中找精子等方法。 总的说来,试管婴儿过程中洗涤精子是非常重要的一个环节,其能有效提升男性精子活力和质量,提高受精成功率,降低畸形胚胎的形成,从而达到优生优育的目的。
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